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组织形态体培养格栅6孔板Amin凯利-帕斯卡设计

Organoid_culture_Grid_6well_Amin_Kelley_Pasca

2023-06-03 07:30:12

使用说明

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摘要

有关该方案及其在人类干细胞衍生类器官培养中应用的详细信息,请参阅我们预印本中的方法部分:

https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.05.31.541819v1

如果您在研究出版物中使用本网格或本网格的任何修改版本,请引用上述预印本(或经同行评审后的手稿)。

网格的概念来自 Neal Amin,最初的网格由 Tommy Li 设计,并参考了 Neal Amin 的意见,此处提供的最终网格设计由 Neal Amin 设计。

这种 3D 网格可插入标准格式的 6 孔培养板。它可以用聚乳酸打印,聚乳酸会慢慢降解成乳酸,对细胞培养很安全。在插入培养皿时,外围的翼会被压缩,从而将其紧紧固定。在一些线条上留有间隙,以便对网格进行轻微压缩--这一点很重要,因为 3D 打印每次都会有轻微误差,压缩间隙可以让网格在打印不完美的情况下也能贴合。高度为 6 毫米,但可以轻松调整。底部有小的扩散口,可以让液体混合,但培养的有机体无法在扩散口之间移动。

随着时间的推移(1-2d),网格可能会轻微挤压 6 孔培养板的塑料,使其变得不牢固,甚至脱落。因此,在将网格插入 6 孔培养板之前,可沿网格外缘涂抹硅酮胶。 硅胶具有惰性,可在几小时到一天内固化。硅胶粘合的网格至少能在几个月内保持与 6 孔培养板的连接。

将网格固定在 6 孔板中后,可以用 70% 的乙醇对网格进行灭菌,并在网格上涂一层聚乙烯醇缩甲醛(PolyHEMA)疏水溶液,以防止有机体粘附在聚乳酸网格上。灭菌和涂层步骤完成后,网格可在标准组织培养箱中进一步进行紫外线灭菌。

最后,用 PBS 冲洗网格,加入培养基(约 6 毫升),将单个器官组织放入网格的每个孔中进行长期培养。可从吸液区吸取培养基。也可在此区域添加培养基。

打印设置

  • 打印机品牌:

    普鲁萨

  • 打印机

    I3 MK3S

  • 筏子
    没有
  • 支持:
    没有
  • 灯丝着火:

    普鲁萨ment PLA White, PRM-PLA-JET-1000)

  • 灯丝颜色

    白色

  • 灯丝材料

    聚乳酸

我是如何设计的

TinkerCad

许可证

CC BY-NC

类有机体_培养_格栅_6威尔_阿明_凯利_帕斯卡
由 萘胺 根据 Creative Commons - Attribution - 没有n-Commercial 许可证。

组织形态体培养格栅6孔板Amin凯利-帕斯卡设计
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